上海elisa試劑盒是如何進行操作的？

發(fā)布時間： 2022-11-26　　點擊次數(shù)： 629次

　　上海elisa試劑盒是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結果判斷較客觀等因素，已廣泛應用在植物學檢驗的各領域中。

　　上海elisa試劑盒的技術關鍵：

　　1、細胞上清：前處理有必要把細胞離心去掉，每孔直接加100μl即可。假定濃度太高需稀釋時，用標準品稀釋液直接稀釋；

　　2、腦脊液：前處理有必要把細胞離心去掉，每孔直接加100μl即可。假定濃度太高需稀釋時，用標準品稀釋液直接稀釋；

　　3、血清血漿：請參與50ul樣本分析緩沖液后加50ul標本，如稀釋量大，請將樣本與樣本分析緩沖液等量參與，缺少部分用標準品稀釋液賠償至100ul；

　　4、組織勻漿液的樣本，要制備過程中需要在緩沖液中參與蛋白酶抑制劑，防止蛋白成份被內(nèi)源性蛋白酶降解，構成查看效果的值偏低。

　　上海elisa試劑盒的實驗操作步驟：

　　1、把試劑混勻，切記實驗時不要加理大量含有泡沫的液體，避免實驗產(chǎn)生誤差。

　　2、跟數(shù)據(jù)測樣決定板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。

　　3、加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。

　　4、甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

　　5、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

　　6、甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

　　7、每孔加入底物各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。一定要避免光照。

　　8、取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。

　　9、在450nm波長處測定各孔的OD值。

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